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84農(nóng)業(yè)網(wǎng) 時(shí)間：2018-03-15 作者：佚名 來(lái)源：網(wǎng)絡(luò)整理
依據(jù)法醫(yī)學(xué)血清學(xué)抗體沉淀反應(yīng)的理論，使用抗鹿Hb（血紅蛋白）血清為抗體，快速準(zhǔn)確地鑒別了鹿血干粉，為這種名貴中藥的原料質(zhì)量控制提供了一種新型準(zhǔn)確穩(wěn)定的方法。
1、實(shí)驗(yàn)與方法
1.1抗鹿Hb血清的制備
抗原：無(wú)菌操作下來(lái)鹿血液若干毫升，裝人加有適量抗凝劑的容器中，冰箱保存。取出以生理鹽水離心洗去血漿成分，取出若干毫升，加入滅菌冷蒸餾水洗制成20－40％的鹿血Hb溶液，除去基質(zhì)后，加等量高滲鹽水，再加入等量不完全福氏佐劑乳化供免疫注射使用。免疫注射：用健康家兔為試驗(yàn)對(duì)象。
以家兔大腿胭窩印肌肉背部皮下為注射本。間隔6日每次4－7ml，各注射一次，歷時(shí)18天，心臟穿刺取血初試滿意后，以免頸A吊線放血法全采血分離血清。效價(jià)及特異性測(cè)定：以事先準(zhǔn)備好的鹿血HbV1/1000，1/2000，1/5000，1/10000，1/30Q0分別測(cè)定l－5號(hào)抗鹿Hb血清的效效價(jià)，結(jié)果各號(hào)抗鹿Hb血清效價(jià)均高于1/1000，、最高5號(hào)達(dá)到1/30000倍，并以其它豬、牛、羊動(dòng)物血色素l/1000作沉淀試劑，結(jié)果均呈陰性反應(yīng)，說(shuō)明抗鹿Hb血清特異性良好。
1.2應(yīng)用抗鹿Hb血清定性鑒別鹿血干粉鹿血干粉來(lái)源于遼寧遠(yuǎn)東藥業(yè)集團(tuán)，樣品標(biāo)號(hào)l~5＃，五個(gè)樣品外觀均為暗紫色干血粉。血樣提取及處理：取1~5＃血樣各0.1g，分別裝入試管中，加人適量生理鹽水，充分?jǐn)嚢�，�?jīng)數(shù)小時(shí)浸泡后，離心取血清液，測(cè)其濃度、以千倍稀釋液作如下試驗(yàn)。沉淀試驗(yàn)：把1~5＃血樣1/1000稀釋液分別用毛細(xì)管壁緩緩注入預(yù)先裝有半量抗鹿Hb血清的微型沉淀管內(nèi)，室溫下日光觀察，沉淀反應(yīng)結(jié)果表明；血樣1，2，3，4，5＃微型沉淀管內(nèi)二液交界面上，15分鐘后出現(xiàn)白色沉淀環(huán)，此為抗鹿陽(yáng)性反應(yīng)。血樣3＃，經(jīng)60分鐘呈抗陰性反應(yīng)，后經(jīng)抗豬Hb血清測(cè)定，鑒定為豬血。即1，2，4，5＃血樣為鹿血。
2、結(jié)果與討論
本文應(yīng)用不完全佐劑加抗原做家兔胭部肌肉及背部皮下注射六日間隔三次，僅十八天便制成了高效價(jià)特異性良好的抗鹿Hb血清，該免疫方法快速準(zhǔn)確。應(yīng)用抗腐血清Hb可方便準(zhǔn)確地鑒定鹿血干粉的真?zhèn)�，為這種名貴中藥材的鑒別及藥材收購(gòu)的質(zhì)量控制提供了一個(gè)良好的鑒定方法，與此同時(shí)，也可為其他動(dòng)物制品的種屬鑒別提供一個(gè)可靠的經(jīng)驗(yàn)。
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