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平菇菌種提純法

84農(nóng)業(yè)網(wǎng)　　 時間：2018-03-15 　　 作者：佚名 　　 來源：網(wǎng)絡(luò)整理

我們總結(jié)的平菇菌種提純法簡便易行，污染率低，很適于設(shè)備簡陋的農(nóng)村應(yīng)用。

一是褶片貼附分離法。利用成熟菇體的菌蓋所產(chǎn)生的孢子進(jìn)行培養(yǎng)而獲得純正菌種。其過程是：首先制備好PDA試管斜面培養(yǎng)基。配備培養(yǎng)基的用品是馬鈴薯200克、葡萄糖20克、瓊脂20克、水1000毫升。將試管存放在14℃～18℃環(huán)境中干燥2天～3天，當(dāng)試管壁上沒有游離水珠時，即可進(jìn)行分離，方法是：選用菇形圓整、菌蓋肥厚、健壯、無病蟲危害、七八成熟的平菇作為分離菌種原材料，在黑暗處借用手電筒的光束，可看到形似白色粉筆灰狀的孢子彈射的狀況。平菇孢子的成熟次序是由基部，即靠近菇體菌柄的一端呈帶狀向前緣推移，在其菌蓋前緣隆起處便是孢子彈射最活躍的部位，在此處剪一段，約1厘米～1.5厘米寬的菌褶，用鑷子剝?nèi)?片菌褶，并用75%酒精涂抹消毒，再將其貼到斜面試管上方的管壁上，并立即豎放到廣口瓶或紙盒內(nèi)。在瓶或盒底部放一層棉花（最好用脫脂消毒棉），固定住試管，以防止試管滑動。然后輕輕調(diào)整試管方向，使表面呈凸凹放射狀排列的菌褶面向試管內(nèi)的斜面培養(yǎng)基，以便彈射孢子能自由降落到培養(yǎng)基上。在18℃溫度下，一般放置12小時，斜面培養(yǎng)基上即可看到與呈放射狀排列的菌褶形狀相似的模糊的孢子印。此時，在無菌接種室或接種箱內(nèi)，用接種鉤將貼附的菌褶取出并塞上無菌脫脂棉塞。封閉管口，以免落下成熟過遲的孢子，然后豎立在26℃溫度下進(jìn)行培養(yǎng)。3天后，孢子呈棉花團(tuán)狀萌發(fā)，10天左右，菌絲即可長滿試管斜面。然后再在無菌接種室或箱內(nèi)，用接種針將載有菌絲的小塊移入另一斜面試管培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)，這樣重復(fù)2次，進(jìn)行無雜菌培養(yǎng)。經(jīng)感官鑒定：分離培養(yǎng)的菌種菌絲密集、粗壯有力，氣生菌絲發(fā)達(dá)，爬壁性強(qiáng)，不分泌色素，菌絲生長速度快，耐高溫，在34℃溫度下照常生長而不發(fā)黃，25℃溫度下約8天可長滿試管斜面，在低溫下保存易形成籽實體。通過出菇試驗，證明這種方法產(chǎn)量高、周期短、抗雜菌污染能力強(qiáng)，可選擇出優(yōu)良菌株并作為原始純菌種轉(zhuǎn)擴(kuò)再用于生產(chǎn)。

二是孢子快速分離法。在乎菇孢子大量散發(fā)出現(xiàn)煙霧狀時，可采用醫(yī)用注射器進(jìn)行孢子快速分離而獲得純菌種。平菇孢子分離的菌種生理年齡小，生活力旺盛，常被當(dāng)作菌種復(fù)壯的方法之一。具體方法如下：①用100毫升的醫(yī)用注射針管和長針頭，經(jīng)75%酒精消毒后，吸入40毫升的無菌水。②推出注射器中的空氣，將針管頭插入菇體孢子彈射的煙霧圈中，拔出針頭，將針管后拉，使煙霧中的部分孢子隨針頭管后拉的吸力進(jìn)入管內(nèi)，然后立即插上針頭并晃動針管，使吸入的孢子與無菌水混合均勻，即成孢子液。③用酒精棉球擦試針頭后，將針頭插穿PDA培養(yǎng)基斜面試管上的棉塞，稍壓推管，滴入3滴孢子液在斜面培養(yǎng)基上，輕輕晃動試管使其均勻鋪開在斜面上。④將斜面試管水平置于24℃～26℃下培養(yǎng)，待孢子萌發(fā)時，挑選無雜菌污染、潔白、健壯的菌絲，在無菌接種室或接種箱內(nèi)轉(zhuǎn)管2次，進(jìn)行純化培養(yǎng)。經(jīng)過出菇試驗后，選擇優(yōu)良菌株作為純種。

注意事項：操作者要戴口罩、手套，并穿著白色醫(yī)用隔離衣。操作前出菇房最好先通風(fēng)，并根據(jù)實際情況進(jìn)行噴霧，使已彈射的孢子沉降地面，以免危害人的身體健康。

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